Листерия моноцитогенес (Listeria monocitogenes), обнаружение ДНК

Общая информация

Тест, который применяется для выявления возбудителя листериоза (Listeria monocitogenes). В процессе анализа при помощи метода полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (РТ-ПЦР) происходит обнаружение генетического материала (ДНК) листерии в образце биоматериала пациента.

Listeria monocytogenes — это грамположительная бактерия, являющаяся возбудителем смертельно опасного заболевания — листериоза.

Листериоз — это инфекционное заболевание, относящееся к группе зоонозов. В естественной среде резервуаром для возбудителя могут являться различные виды грызунов, а также домашние животные, например, куры, утки, кролики, свиньи, коровы. Листерии являются достаточно устойчивыми в окружающей среде, они способны в течении длительного времени сохранять жизнеспособность в фекалиях, почве, зерне. Возбудитель способен размножаться в условиях низких температур +4 до –6 ºС, при этом он быстро погибают при нагревании либо под воздействием дезинфицирующих средств.

Преимущественный путь передачи инфекции – это употребление в пищу зараженных фруктов и овощей, а также продуктов животного происхождения. Иногда заражение происходит во время контакта с животными.

Самой опасной инфекция считается для беременных, новорожденных младенцев, а также тех, кто проходит курс иммуносупрессивной терапии или страдает иммунодефицитными состояниями.

Длительность инкубационного периода варьируется от 2 до 4 недель. Манифестация листериоза может происходить остро с озноба, повышения температуры, эритематозных высыпаний в области крупных суставов, увеличения и появления болезненности лимфатических узлов. При поражении центральной нервной системы у пациентов могут возникать менингеальные симптомы.

В редких случаях основным проявлениями инфекции является развитие симптомов острого гастроэнтерита, пиелита, эндокардита. При инфицировании на этапе гестации возможно заражение плода трансплацентарно во время беременности. Врожденный листериоз обусловлен развитием септического состояния, которое может вызывать гибель ребенка. Клиническая диагностика затруднена и требует лабораторного подтверждения заражения, для этих целей применяется бактериологические посевы мазков из зева, помимо этого, биологическим материалом для проведения исследования может служить кровь, спинномозговая и околоплодные жидкости.

Для обнаружения листерий и диагностирования листериоза используются серологические методы, посев биоматериала пациента на культуральные среды и обнаружение ДНК бактерий, посредством метода ПЦР.

Серологический метод и посев обладают рядом ограничений, в следствии чего тесты, основанные на использовании метода ПЦР являются самыми удобными и чувствительными.

ПЦР в реальном времени (РТ-ПЦР) представляет собой лабораторный тест, который позволяет обнаружить в биоматериале пациента ДНК возбудителя. Принцип метода основан на том, что ДНК возбудителя, которого необходимо обнаружить, много раз копируется при помощи специальных ферментов (ДНК-полимераз). Чаще всего выполняется несколько десятков циклов в процессе которых нужная ДНК удваивается. В следствии этого количество исследуемой ДНК увеличивается в миллионы раз, что позволяет ее детектировать при помощи флуоресцентного красителя.

При проведении ПЦР в режиме реального времени количество ДНК обнаруживается в процессе копирования, после каждого цикла. Однако использование РТ-ПЦР не позволяет различить формы инфекции.

Показания

ПЦР-анализ на листерии применяется для обнаружения инфекции, вызванной Chlamydia trachomatis и мониторинга качества ее лечения.

В каких случаях потребуется назначение данного теста:

для выявления этиологического агента у больных лиц, с клиническими признаками гнойных менингитов, менингоэнцефалитов, сепсиса, хронических воспалений мочевыводящих путей, гастроэнтерита, при подозрении на листериоз;

при подозрении на листериоз у беременных женщин, особенно в третьем триместре беременности и новорожденных с клиническим проявлениями септицемии, пневмонии и гнойного плеврита.

Полученные результаты

Референсные значения: отрицательно.

Предполагаемые болезни

Отрицательный результат теста указывает на отсутствие у пациента заражения листериями.

Положительный результат теста подтверждает наличие листериоза.

Врач-консультант

Данное исследование может быть назначено врачом общей практики, терапевтом, инфекционистом, гинекологом.