Исследования противовирусной активности действующего вещества протефлазид в отношении коронавирусов, включая SARS-CoV-2

Доклиническими исследованиями еще в 1998 году изучены основные механизмы прямого противовирусного действия, которые описаны в утвержденной МОЗ Украины инструкции к препарату Протефлазид®, в частности "флавоноиды, которые входят в состав препарата, подавляют репликацию ДНК-вирусов и РНК-вирусов как in vitro, так и in vivo. Доказано, что механизм прямого противовирусного действия заключается в подавлении вирусоспецифических ферментов – ДНК- и РНК-полимеразы, тимидинкиназы, обратной транскриптазы и нейраминидазы. Препарат защищает слизистые оболочки, нормализуя показатели их местного иммунитета (лактоферрин, секреторный иммуноглобулин А, лизоцим и С3 компонент системы комплемента). Установлено, что препарат является индуктором синтеза эндогенных α- и γ-интерферонов до физиологически активного уровня". Препарат подавляет окислительные процессы в организме человека, препятствуя возникновению острого респираторного дистресс-синдрома, то есть геморрагического воспаления легких.

Видео дня

Как отметил президент Национальной академии медицинских наук Украины, академик Виталий Цымбалюк, на основе изучения препарата Протефлазид® написано 9 докторских и 38 кандидатских диссертаций, "в том числе и об использовании в комплексном лечении пациентов с острым респираторным дистресс-синдромом (ОРДС)". Как известно, в 2020 году ОРДС стал массовым явлением в качестве осложнения после перенесенной болезни СOVID-19.

Ввиду того, что коронавирус SARSСoV-2 является РНК-содержащим вирусом, логично было бы предположить, что действующее вещество, антивирусное влияние которого на фермент РНК-полимеразы давно изучено, активно и в отношении нового вируса. Это предположение и было успешно доказано рядом исследований за период пандемии 2020 года. Весь мир искал и продолжает искать ингибиторы РНК-полимеразы для защиты от вируса SARS-СoV-2. Препараты с таким механизмом действия существуют в Украине уже 20 лет, но почему-то их никто не заметил. А жаль, многих из 20 тысяч погибших можно было спасти…

ПРОТЕФЛАЗИД И КОРОНАВИРУСЫ: ИССЛЕДОВАНИЯ НАМН УКРАИНЫ

В отношении коронавирусов эффективность препарата детально изучали в Институте эпидемиологии и инфекционных болезней им. Л.В. Громашевского Национальной академии медицинских наук Украины. Действие изучали в доклинических исследованиях по двум направлениям:

• методом компьютерного моделирования (докинга) непосредственно с моделью коронавируса – тогда, до конца марта 2020 года, он еще • именовался 2019-nCoV;

• тестированием действия препарата на двух культурах живых клеток, зараженных коронавирусом трансмиссионного гастроэнтерита свиней (ТГС): вируса – дальнего родственника SARS-СoV-2 (исследование профессора Светланы Рыбалко).

Методом молекулярного докинга было установлено, что действующее вещество протефлазид "хорошо располагается в каталитическом кармане протеазы 3CL коронавируса SARS-CoV-2, образуя водородные связи с остатками 144-Ser, Gly-143, располагаясь между каталитическими остатками His-163, Asn-142 и Cys145. Это свидетельствует о высокой вероятности подавления активности 3CL-протеазы коронавируса SARS-CoV-2". Препарат продемонстрировал подавление репликации ТГС коронавируса в клеточной культуре на 5–6 логарифмов, или в миллион раз. Для справки: высокоэффективным противовирусным препаратом считается тот, который может подавить репликацию вируса на 2 логарифма, то есть в 100 раз.

ПРОТЕФЛАЗИД И КОРОНАВИРУСЫ COV-229E И SARS-COV-2: ИССЛЕДОВАНИЯ В ГЕРМАНИИ

В Гельмгольц-центре исследований инфекционных заболеваний (Helmholtz Centre for Infection Research, Брауншвейг, Нижняя Саксония, Германия) весной-осенью 2020 года исследована противовирусная активность действующего вещества протефлазид in vitro против человеческого коронавируса CoV-229E, родственного SARS-СoV-2. Методом биолюминесцентной оценки (Dual Luciferase Reporter Gene Assay) доказано подавление репликации вируса CoV-229E под влиянием действующего вещества протефлазид.

ПРОТЕФЛАЗИД И КОРОНАВИРУС SARS-COV-2: ИССЛЕДОВАНИЯ В ИСПАНИИ

В лаборатории BSL3 Центра исследований здоровья животных (СRESA – Centre de Recerca en Sanitat Animal при инcтитуте IRTA, Universitat Autònoma de Barcelona, Каталония, Испания) in vitro на культуре клеток Vero E6 исследована специфическая противовирусная активность действующего вещества протефлазид против коронавируса SARS-CoV-2, выделенного у 89-летнего пациента, больного COVID-19. При этом протефлазид показал высокую противовирусную активность в отношении SARS-CoV-2.

ПРОТЕФЛАЗИД И КОРОНАВИРУС SARS-COV-2: ИССЛЕДОВАНИЯ В США

В Галвестонской национальной лаборатории (GNL, штат Техас, США) в условиях биологической безопасности 3 (BSL-3) были проведены исследования антивирусного действия препарата Протефлазид® на модели коронавируса SARS-CoV-2. Для оценки эффективности исследуемого препарата против SARS-CoV-2 использовали модифицированную реакцию микронейтрализации (МН) на двух моделях культур клеток: почки африканской зеленой мартышки (Vero E6) и аденокарценомы альвеолярных базальных эпителиальных клеток человека, стабильно экспрессирующих человеческий рецептор ACE-2 (A549/ACE2). В исследовании антивирусного действия препарата Протефлазид® на модели SARS-CoV-2 в концентрациях от 10 до 1,25 мкг/ мл соединение наносили однократно вместе с вирусом за 30 минут и 2 часа до инфицирования. Установлено, что Протефлазид® на 100 % защищал клетки от вирусспецифического цитопатического действия в концентрациях 2,5–1,25 мкг/мл в указанных экспозициях, как на модели культур Vero E6, и в концентрациях 5–2,5 мкг/мл на модели культур клеток A549/ACE2 (внесен вместе с вирусом за 30 минут и 2 часа).

ФЛАВОНОИДЫ И КОРОНАВИРУС SARS-COV-2

Ряд исследовательских групп в разных странах мира, изучая действующее вещество протефлазид, независимо друг от друга установили угнетение протеазы коронавируса SARS-CoV-2 флавоноидными соединениями, полученными из разных растений. Так, среди действующих на коронавирус флавоноидных соединений названы такие флавоноиды, как апигенин, лютеолин, кверцетин, аментофлавон, даидзеин, пуэрарин, эпигаллокатехин, эпигаллокатехин галлат, галлокатехин галлат и кемпферол. Природные ароматические полифенолы: апигенин, лютеолин и кверцетин – входят и в состав действующего вещества протефлазид, и таким образом его влияние на SARS-СoV-2 также может считаться опосредованно установленным.

Без сомнения, большой интерес вызывает и работа, изложенная в научной статье "Активация транскрипционного фактора Nrf2". Фактор Nrf2 подавляет путем снижения экспрессии рецепторов ангиотензина – конвертирующего гормона 2 (ACE2) – тяжелый острый респираторный синдром, воспалительный процесс и оксидативный стресс в выстилающих эпителиальных клетках организма человека. С помощью этой научной работы стал понятен механизм действующего вещества протефлазид, который защищает легкие человека от тяжелого острого респираторного дистресс-синдрома (геморрагического воспаления легких), снижая тяжесть течения заболевания, вызванного вирусом SARS-СoV-2, и спасая жизнь человека.

Из информации, полученной компанией "Экофарм" от 90 клиник Украины, где препарат Протефлазид® принимали пациенты, инфицированные вирусом SARS-СoV-2, с целью профилактики и лечения COVID-19 в легкой, средней и тяжелой фазах заболевания, был сделан самый важный вывод: ни один пациент из более 9 тысяч человек, принимавших препарат, не умер – все выздоровели! В этом и состоит главная задача препаратов прямого противовирусного действия – уберечь человека от тяжелых осложнений и спасти ему жизнь.

Состав действующего вещества протефлазид: флавоноиды апигенин, лютеолин и трицин. Имеют широкий спектр противовирусной активности. Согласно опубликованным исследованиям, они: - Подавляют репликацию ДНК- и РНК-вирусов путем воздействия на ряд "мишеней" – вирусоспецифических ферментов ДНК- и РНК-полимеразы, тимидинкиназы, обратной транскриптазы, нейраминидазы и 3CL-протеазы. - Препятствуют проникновению вируса в клетки эпителия. - Блокируют размножение вируса внутри клетки, чем защищают клетки организма от окислительного стресса и воспаления, уменьшая вероятность возникновения острого респираторного дистресс-синдрома и цитокинового шторма.